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ELISA实验吸光值衰减是什么原因?
点击次数:245 发布时间:2018-07-17

高教师向吴司理详细的说明晰试验中呈现的状况,于是来电向研域(上海)生物销售人员吴司理咨询:加完显色液(购买)显色必定时刻后,再加停止液(2M H2SO4,自己制造)后,当即测验其吸光度值,等过几分钟再测验吸光度值,发现两次测得的吸光度值发作衰减。第2次均小于第一次。
吴司理对试验的问题有了必定的了解,随后组织技术人员为高教师去,为其解决这一问题,高教师恍悟道:本来ELISA吸光度值衰减这样处理就可以啦。
其实详细的原因也很简单,有可能是显色液的质量不够好。一般状况下,停止反应后OD值的下降前期不是很明显。停止后,吸光度值是会随着时刻衰减,所以一般是加完停止液后当即测,这样比较准。西北大学的高教师在操作ELISA试剂盒试验的时分发现了一个问题,
并且,加停止液时,从*条加到第12条后,测验发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。条件是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白。
再次剖析12条显现逐级递减的原因看看是否是:

① 显色时刻调整,如果您现在的显色时刻是10MIN,那调整到30MIN,再加停止液,调查上述现象是否呈现。

② 停止液中参加少数甘油看下怎么样。

  ELISA试剂盒显色时刻是30分钟,停止后要求在30分钟内检测,参加停止液后,zui好在参加停止液后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高。拟合值能到达四个9。 
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